大便潜血 粪便隐血试验及临床意义
六壹养生目前潜血试验主要采用化学法。如邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、Pirami cave法、无色孔雀石绿法、愈创木基法等。实验设计原理基本上是血红蛋白中的含铁血红素可以催化过氧化物的分解，过氧化物可以催化试剂中的过氧化氢，分解释放新的生态氧，将上述显色物质氧化成颜色。色深反映的是血红蛋白的量，也就是出血量。虽然上述检测方法原理相同，但在实际应用中，由于粪便成分的区分度较大，且每个实验室的操作细节不同，如粪便量、试剂配方、观察时间等，导致结果差异较大。我站收集的稀释血红蛋白溶液对这些方法的敏感性研究表明，邻甲苯胺法、邻甲苯胺法和还原酚酞法最敏感，只要消化道出血1-5ml，即可检测出0.2-1mg/L血红蛋白。减少酚酞的方法被放弃了，因为试剂极不稳定，放置时会自发氧化并变红。高灵敏度的邻甲苯胺法容易产生假阳性结果。中度敏感试验包括联苯胺法和无色孔雀石绿法，可检测1-5mg/L血红蛋白，消化道出血5-10ml为阳性。联苯胺法有致癌作用，但无色孔雀石绿法在不加异喹啉时灵敏度较差，试剂的配制和来源也不如拉米东法方便。愈创木脂素法灵敏，检测需要6-10毫升/升血红蛋白。此时消化道出血可达20ml，但假阳性很少。如果这种方法是阳性的，基本上可以诊断消化道出血。目前，国内外都生产以四甲基联苯胺和愈创木基为显色基质的潜血测试带，使潜血测试更加方便，但并没有解决潜血测试方法研究中存在的问题。
以上隐血试验的化学方法虽然简单易行，但都是基于血红蛋白中的血红素能促进含氧水分解释放新的生态氧，氧化显色物质的原理，缺乏特异性准确性。此外，化学试剂不稳定，长期存放会削弱反应。外源性动物仪器，如血红蛋白、肌红蛋白及其血红素等，可使检测呈阳性，而大量生蔬菜中含有活性植物过氧化物酶，也能催化过氧化氢的分解，导致假阳性反应。所以除了愈创木脂法，要求吃素3天。因此，有人建议，可以通过用水1: 3稀释和煮沸粪便，并用冰醋酸和乙醚提取血红蛋白来消除干扰。这种方法虽然可靠，但不适合日常工作。如果添加的血液在肠道停留时间过长，血红蛋白被细菌降解，血红素不复存在，就会出现与病情不符的阴性结果。患者大量服用维生素C等具有还原作用的药物，使实验中过氧化物减少，显色物质不再被氧化，潜血试验也可假阴性。除了桩干扰潜血试验外，由于检验人员采样位置不同、标本反应时间不同、检验人员显色判断不同，不同方法的试验也可能出现误差，导致目前国内外尚无普遍认可的推荐方法，更谈不上实验的标准化。
为了解决潜血试验的特异性问题，识别消化道出血部位，免疫学方法，如免疫扩增、免疫电泳、酶联免疫吸附试验、免疫斑点试验、乳胶免疫化学凝集、放射免疫测定、反向间接血凝、胶体金标记夹心免疫测定等。，都是目前开发出来的。此类试验中使用的抗体分为两类，一类是抗人血红蛋白抗体，另一类是抗人红细胞基质。免疫学方法灵敏度高。一般血红蛋白为0.2mg/L，粪便0.03mg/g可获得阳性结果，特异性高。各种动物的血红蛋白在500mg/L辣根过氧化物酶为2000mg/L时不会产生干扰，因此不需要控制饮食。根据Herzog和Cameron的研究，正常人24小时胃肠道的生理性失血量为0.6ml，由于免疫学方法的高敏感性，又由于正常的生理性失血量，这样的高敏感性会在一些正常人身上造成假阳性，尤其是在服用刺激备用肠道的药物后。但免疫学分支潜血试验主要检测下消化道的优势，目前被认为是最适合大肠癌筛查的试验。免疫学分支潜血试验主要检测下消化道出血，约40-50%的上消化道出血无法检测。原因如下:①血红蛋白或红细胞被消化酶降解，无原始免疫原性；②过度大出血引起的反应系统内抗原过多表现为前带现象；患者血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配，所以有时外观为柏油样大便，但免疫法为阴性或弱阳性。在这个过程中，需要将原来稀释的大便稀释50-100倍，重新做一次或用化学方法重新检查。近年来，一些实验室也采用卟啉荧光血红蛋白定量检测，利用草酸试剂将血红蛋白变为卟啉进行荧光检测，这样除了在粪浴中未降解的血红蛋白外，还可以检测血红蛋白衍生物卟啉，克服了化学法和免疫法受血红蛋白降解影响的缺点，对上、下消化道出血同样敏感。但外源血红素和卟啉类物质干扰，方法复杂，不易推广使用。此外，免疫学方法已从检测血红蛋白和人红细胞基质扩展到检测其他抗原性好、不易在粪便中迅速下降的蛋白，如白蛋白和转铁蛋白，灵敏度为2 mg/L .
粪便隐血检查对消化道出血的诊断有重要价值。当出现消化性溃疡、药物性胃黏膜损伤、肠结核、克罗恩病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病、胃癌、结肠癌等消化系统肿瘤时，粪便隐血试验常为阳性，需结合其他临床资料进行鉴别诊断。诊断为消化性溃疡时，阳性率为40-70%，呈间歇性阳性。消化性溃疡治疗后，大便看起来正常时，潜血试验阳性可持续5-7天，然后如果出血完全停止，潜血试验可转为阴性。在消化道肿瘤中，阳性率可达95%，表现为持续性阳性，因此粪便隐血试验常作为诊断消化道恶性肿瘤的筛查指标。尤其对中老年人早期发现消化道恶性肿瘤具有重要价值。此外，流行性出血热患者的粪便隐血试验也有84%的阳性率，可作为该病的重要证据。
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