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thp1 MBL对LPS刺激的不同分化和活化状态THP1/CD14细胞产生TNF

导语:摘要:目的探讨甘露聚糖结合凝集素在脂多糖刺激的不同分化和激活状态下对THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-12的影响。方法用PMA和/或γ-干扰素诱导处于不同分化和激活状态的THP1/CD14细胞,用不同浓度的人MB

摘要:目的探讨甘露聚糖结合凝集素在脂多糖刺激的不同分化和激活状态下对THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-12的影响。

方法用PMA和/或γ-干扰素诱导处于不同分化和激活状态的THP1/CD14细胞,用不同浓度的人MBL预处理2h,然后用光滑LPS刺激24h。收集培养上清液,用酶联免疫吸附法从蛋白水平分析肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-12 p40+p70的产生。从细胞中提取总核糖核酸,用逆转录聚合酶链反应从转录水平评价肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-12的表达。

结果酶联免疫吸附试验显示脂多糖能刺激肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-12 P40+P70的分泌。IFN-γ激活的THP1/CD14细胞产生最高的IL-12 p40+p70,而PMA分化的THP1/CD14细胞产生最低。经PMA分化并经IFN-γ激活的THP1/CD14细胞分泌的TNF-α最高,而未经PMA或IFN-γ预刺激的THP1/CD14细胞分泌的TNF-α最低。高浓度MBL可抑制脂多糖诱导的肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-12 p40+ p70的分泌,而低浓度MBL作用不大。RT-PCR分析还表明,高浓度MBL对脂多糖诱导的不同实验组TNF-α、IL-12 p35和p40 mRNA表达均有不同程度的抑制作用。

结论MBL能抑制脂多糖诱导的不同分化和活化状态的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-12。THP1/CD14细胞可作为进一步分析MBL在免疫应答和细胞因子网络调节中的作用和机制的模型。

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