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菌种保存 菌种保藏的方法

导语:疫苗,多指国内多家特定菌种保藏管理中心的成品疫苗,在液氮条件下分装于安瓿中。根据我国规定,公司必须从我国特定的真菌保护管理中心采购菌种,不应选择国外种苗。常见菌种的保存方法1、菌种保存的基本原则根据微生物菌株的生理生化特性

疫苗,多指国内多家特定菌种保藏管理中心的成品疫苗,在液氮条件下分装于安瓿中。根据我国规定,公司必须从我国特定的真菌保护管理中心采购菌种,不应选择国外种苗。

常见菌种的保存方法

1、菌种保存的基本原则

根据微生物菌株的生理生化特性,在人力标准下,尽可能降低微生物菌株体细胞的代谢抗压强度,使体细胞基本处于休眠模式,生长发育和繁殖受到抑制而不死亡,从而降低菌株的基因变异率。超低温、干燥、缺氧、缺乏维生素A等自然环境标准可抑制微生物菌株的代谢。

超低温、干燥、狂躁,真空泵是保存菌种的关键方式。在选择储存方法时,首先要考虑该方法能否长期保持疫苗原有的特性,同时还要考虑该方法的经济性发展和简便性。在具体工作中,通常会单独应用各种标准来提高实际的存储效果。

2.细菌保存过程

血压选择具有典型特征的纯细菌;

适合血液储存的细菌形状;

补充选择最合适的储存方法;

定期对带负荷储存的苗木进行检查,看是否有变化。如有变化,必须改变贮藏方法,贮藏期满应立即进行移栽;

3、琼脂斜面超低温保存方法

方法:

常用疫苗的典型菌接种在斜坡上,按照规定的温度和时间成型,经过充分的生长发育后,用包装纸保护成型的新鲜疫苗。为了缓解培养液中水分的蒸发,增加保存时间,菌种保存管的棉塞可以换成橡胶塞。储存在4℃的冰箱里。每2~3个月移植一次,再次保存。如果用半固态高层住宅文化液穿刺成型,可以保存半年-一年。有些甚至更久。

用途:储存细菌、酵母和霉菌。

特征:

优点是——营销推广简单方便;一般不需要选择另一种培养液保存;它可以用于大多数微生物菌株。

缺点是保存期太短;传代次数多,易发生遗传变异和环境污染。

常见问题:

储存的疫苗应该是具有丰富生命魅力的新鲜成型品,至少应该是第三代的成型品。

储存时,破伤风杆菌可以用肉培养液;产孢梭菌的巯基乙酸水动力培养液。一定要定期保持储存疫苗的冰箱的温度和环境湿度,以及疫苗管的棉塞是否松动或发霉。如有异常,应妥善处理。

每次试管移植后,都要与原疫苗的序列号和名称逐一核对,确认培养基的特性和纯度准确无误后再重新保存。

储存疫苗的培养基应低糖,其他食用菌的含糖量应低于2%,以防止过量产酸,影响疫苗的存活。

铜绿假单胞菌在冰箱中容易引起自溶而死亡,因此不适合以这种方式储存。

4.液体石蜡储存方法

该方法利用石蜡将成型品与气体阻隔,降低疫苗的生理生化水平,避免水分挥发,从而增加疫苗的保存期;

方式

在斜坡上接种疫苗或在0.3~0.5%琼脂半固体高层住宅培养基中穿刺,定型备用。试管婴儿中放入化学纯液体石蜡,每管10 ~ 15毫升,加棉塞,用瓶塞包好纸,121℃高压灭菌30分钟,然后放入37℃培养箱或110~170℃电烤箱1 ~ 2小时或空空气干燥器除去液体石蜡中的水分。

在成型的疫苗试管婴儿中加入液体石蜡,液体石蜡的液面最好比培养液的顶部高1㎝。试管婴儿站立并储存在4℃的冰箱中。

应用领域:适用于储存一些霉菌、酵母菌、放线菌,但对病菌储存的实际效果较弱。

特点:该方法简单易行,是实验室常用的储存方法。这种方法的关键是将疫苗与气体隔离。

常见问题:

储存血压时,用新鲜的模制品接种疫苗。检查纯度和特性后,可以进行储存;

在整个储血过程中,需要观察斜坡是否干燥,如果干燥,需要再次移植;

补充应用疫苗时,先将疫苗管歪斜,使液体石蜡向一侧流动,再用接种针挑取成型物,接种在新鲜斜坡上成型。模制物体更新后,可以移植一次到新的斜坡上应用;

将沾有少量液体石蜡的接种针浸入95%乙醇中一段时间,然后燃烧灭菌,防止液体石蜡立即在酒精燃烧器下燃烧时飞溅,造成环境污染;

疫苗管内足月液体石蜡的高宽比高于培养液。如果太多,会影响疫苗的蒸汽交换,使实际储存效果不太好;如果太少,斜坡非常容易干燥,这将缩短储存期。一般比坡度高1cm为好;

无菌检测用液体石蜡从软管中取出时,每管中的量不宜过多,否则液体石蜡散装到疫苗培养液中容易造成环境污染。

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