密度梯度离心 超速离心和梯度密度离心法

超速离心是分离亚细胞和蛋白质大分子的有效方法，通常是进一步纯化的第一个筛子。超速离心分为差速离心和梯度离心。差速离心是指低速和高速交替离心，用于分离不同大小的颗粒。梯度密度离心是一种分区分离方法，通过梯度密度保持重力的稳定性。通过离心，沉淀颗粒的比重大于液体，漂浮颗粒的比重小于液体。通常，待分离的悬浮液中的颗粒比液体重。如果要漂浮，必须加入第三种成分，使其密度连续或不连续地增加，形成所谓的梯度。第三种成分是甘油、蔗糖、氯化铯或氯化铷。如果在梯度柱范围内表示的密度大约等于待分离颗粒的密度，则在长时间离心后可以实现分离。这种方法被称为密度离心或梯度离心。

利用超速离心或梯度离心分离纯化抗原只是一种基于抗原比重特性的方法，除个别成分外，某些抗原成分的分离极其困难。目前仅用于少数大分子抗原，如IgM、C1q、甲状腺球蛋白等。，以及一些比重较轻的抗原性物质，如载脂蛋白A、B等。对于大量的中小分子量蛋白质，不宜采用超高速和梯度密度离心作为纯化手段。