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柱色谱 柱色谱法的工作原理

导语:分析化学是执业药师考试的基础学科。柱色谱在中药成分的分析和鉴定中具有重要作用,在实际工业生产中经常使用。希望大家能在时间的基础上掌握。所用的层析管是一根内径均匀、下端颈缩的硬玻璃管,用棉花或玻璃纤维塞住,填充吸附剂。色谱柱

分析化学是执业药师考试的基础学科。柱色谱在中药成分的分析和鉴定中具有重要作用,在实际工业生产中经常使用。希望大家能在时间的基础上掌握。

所用的层析管是一根内径均匀、下端颈缩的硬玻璃管,用棉花或玻璃纤维塞住,填充吸附剂。色谱柱的尺寸、吸附剂的种类和用量以及洗脱过程中的流速都在每个单体中规定。吸附剂颗粒应尽可能保持大小均匀,以确保良好的分离效果。除非另有规定,通常使用直径为0.07-0.15毫米的颗粒。吸附剂的活性或吸附能力对分离效果有影响,应引起重视。

吸附剂干装法:将吸附剂加入层析管一次,振动管壁使其下沉均匀,然后沿管壁缓慢加入层析用流动相,或在层析管下端出口处加入活塞,加入适量流动相,旋松流动相使其缓慢滴出,再从管顶缓慢加入吸附剂进行编辑,使其湿润下沉均匀,在管内形成一层松紧适度的吸附层。在操作过程中,吸附层上应保持足够的流动相。湿法:将吸附剂与流动相混合,搅拌除去空气泡,慢慢倒入层析管中,然后加入流动相,冲洗附着在管壁上的吸附剂,使层析柱表面平整。

当用于填充吸附剂的流动相从色谱柱自然流下,并且液面稳定柱表面时,加入样品溶液。

除非另有规定,样品应溶解在色谱中使用的流动相中,然后沿色谱管壁缓慢加入。注意不要打开吸附剂。或将样品溶解在适当的溶剂中。与少量吸附剂混合均匀,挥发溶剂,使其疏松;在准备好的色谱柱上加入与样品混合的吸附剂。如果样品不溶于常用溶剂,可在研钵中将样品与适量吸附剂研磨混合后加入。

洗脱,除非另有规定,通常根据流动相的洗脱能力进行编辑和分类,流动相的品种和比例是递增变化的,流出液是单独收集的,然后当流出液中含有的成分显著减少或不再含有时,流动相的品种和比例也发生变化。在操作过程中,吸附层上应保持足够的流动相。

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