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白细胞介素1 白细胞介素

导语:取肝素抗凝,用分层液离心分离单核细胞,配制一定浓度,加入到塑料培养板的孔中,孵育1-3小时,洗去非贴壁细胞,然后在每个孔中加入含有一定浓度LPS的细胞培养液,继续孵育一定时间,收集上清液检测IL-1活性。检测IL-1活性最

取肝素抗凝,用分层液离心分离单核细胞,配制一定浓度,加入到塑料培养板的孔中,孵育1-3小时,洗去非贴壁细胞,然后在每个孔中加入含有一定浓度LPS的细胞培养液,继续孵育一定时间,收集上清液检测IL-1活性。

检测IL-1活性最常用的方法是小鼠胸腺细胞增殖反应。该方法原理:IL-1可辅助ConA或PHA刺激小鼠胸腺细胞增殖,增加增殖细胞的DNA合成。细胞培养结束前6小时加入3H-TdR,细胞培养结束后收集细胞,检测放射性,即可判断IL-1的活性。由于IL-1可以促进小鼠T细胞继代培养LBRM-33和EL-4分泌IL-2,当含有IL-1的样品加入到上述细胞培养液中时,培养上清液中的IL-2会增加。采集分选后,用IL-2依赖细胞株测定IL-2的分泌,可间接推断样品中IL-1的含量。白细胞介素的其他生物检测方法大致相同,白细胞介素依赖性菌株常被用作增殖反应细胞。

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